第01章 绪论

第01章 绪论 单元测验

1、关于动物胚胎工程的学科内涵论述正确的是
    A、动物胚胎工程是以动物胚胎移植技术为基础;
    B、动物胚胎工程是以优良畜种快速繁殖、家畜品种改良和抗病育种为主要目的;
    C、动物胚胎工程是以动物配子、早期胚胎、胚胎干细胞以及体细胞等生物材料为操作对象;
    D、应用动物胚胎工程技术可获得动物个体、改变动物的遗传特性和生物性状、提高动物的生产性能或抗病性能、获得动物产品。

2、动物胚胎工程的主要研究内容包括
    A、动物配子发生、受精与早期胚胎发育过程及其调控机制的研究;
    B、动物超数排卵与胚胎移植、动物体外受精与胚胎体外培养、动物胚胎与卵母细胞冷冻保存;
    C、动物性别控制、动物胚胎干细胞;
    D、动物克隆技术和动物转基因技术。

3、动物胚胎工程的主要操作对象是
    A、精子;
    B、卵母细胞;
    C、受精卵;
    D、早期胚胎。

4、关于动物早期胚胎发育描述正确的是
    A、受精卵经过早期卵裂,即经过2细胞、4细胞、8细胞、16细胞,胚胎致密化形成桑椹胚;
    B、桑椹胚胚胎细胞发生初步分化出现囊胚腔,形成囊胚;
    C、囊胚继续发育为扩张囊胚;
    D、扩张囊胚完成胚胎的孵化过程形成孵化囊胚。

5、根据不同的科学研究或胚胎移植生产的需要,可以从超数排卵动物获得
    A、不同发育阶段的卵母细胞;
    B、受精卵;
    C、不同发育阶段的早期胚胎;
    D、较多数量的受孕母体。

6、胚胎移植技术中移植的胚胎可包括
    A、通过超数排卵获得的体内生产胚胎;
    B、通过体外受精获得的体外生产胚胎;
    C、通过细胞核移植获得的体外生产胚胎;
    D、通过转基因技术生产的胚胎。

7、以下有关显微受精技术描述错误的是
    A、借助显微操作工具将精子直接注入到卵母细胞内实现精、卵受精;
    B、借助显微操作工具将精子细胞直接注入到卵母细胞内实现精、卵受精;
    C、借助显微操作工具将体细胞直接注入到卵母细胞内的技术;
    D、借助显微操作工具将精子直接注入雌性生殖道内的技术。

8、以下有关试管动物描述错误的是
    A、通过体外受精、受精卵体外培养和受体移植获得的动物可称为试管动物;
    B、通过显微受精、受精卵体外培养和受体移植获得的动物可称为试管动物;
    C、通过体外培养,在试管中发育至足月胎儿获得的动物称为试管动物;
    D、试管动物是指受精过程,胚胎发育过程均在试管内完成的动物。

9、动物干细胞根据其来源可分为
    A、胚胎干细胞;
    B、成体干细胞;
    C、诱导性多能干细胞;
    D、全能性干细胞。

10、胚胎干细胞可来源于
    A、囊胚的内细胞团;
    B、原始生殖细胞;
    C、囊胚的滋养层细胞;
    D、脐带血。

11、制备克隆动物的技术方法包括
    A、胚胎分割;
    B、细胞核移植;
    C、胚胎嵌合;
    D、体外受精。

12、动物胚胎工程的研究与应用价值包括
    A、动物快速扩繁、品种改良与抗病育种;
    B、动物种质资源保存;
    C、利用动物个体生产生物活性物质;
    D、助推人类医学研究与临床治疗的进步。

13、动物胚胎工程是一门研究动物配子与各个发育阶段胚胎工程化操作技术的学科。

14、动物配子发生是指原始生殖细胞的起源、迁移与有丝分裂,再经过雄性配子发生和雌性配子发生,最终形成成熟的精子和卵母细胞的过程。

15、超数排卵是指应用外源细胞因子诱导雌性动物卵巢上多个卵泡发育成熟并排出具有受精能力的卵母细胞,对超排动物进行配种最终获得较多数量的受精卵或早期胚胎的技术。

16、胚胎移植又称受精卵移植,是指将受精卵或早期胚胎移植到受体动物输卵管或子宫角内,通过受体动物的妊娠而孕育出后代的技术。

17、体外受精指在体外条件下,通过人工操作使精子和卵母细胞完成受精的技术。

18、胚胎体外培养指根据早期胚胎代谢特点和营养需求,利用胚胎培养液和适宜的培养条件,使受精卵体外发育到足月胎儿的体外培养技术。

19、动物胚胎与卵母细胞冷冻保存就是将胚胎或卵母细胞悬浮在由冷冻保护剂和胚胎保存液或卵母细胞保存液共同组成的冷冻保护液中,采用一定的冷冻降温程序降至零下某一温度,并在稳定的冷冻介质中长期冷冻保存,使胚胎或卵母细胞在冷冻保存温度停止代谢而又不失去升温后恢复代谢与发育能力的一种长期保存胚胎或卵母细胞的技术。

20、动物性别控制即通过人为地干预或操作,使动物按照人们的设计改变动物个体本来性别的技术。

21、自我更新和多能性是所有动物细胞的共有特点。

22、iPS细胞是向体外培养的体细胞转入特定基因或加入特定因子,诱导其重编程形成的多能性干细胞,iPS细胞的生物学特性与ES细胞类似,并具有发育的多能性。

23、克隆动物是指利用动物的有性繁殖技术,由单一个体产生基因型完全一致的动物个体或群体的技术。

24、动物转基因技术指通过一定方法把人工重组的外源DNA序列导入受体的基因组中或把受体基因组中的一段DNA序列切除,从而使受体动物的遗传信息发生人为改变,并且这种改变能稳定地遗传给后代的技术。

25、转基因动物是指那些在其所有体细胞基因组内稳定整合外源DNA或切除一段自身DNA的一类动物,这类动物由于遗传物质的改变被赋予某种新的表型,但这种表型不可通过生殖细胞而传递给子代动物。

第01章 绪论 单元作业

1、说明动物胚胎工程的学科内涵、研究内容,解释动物胚胎工程各研究内容的含义。(20分)

第02章 动物配子发生、受精与早期胚胎发育

第02章 动物配子发生、受精与早期胚胎发育 单元测验

1、精子形成不包括以下哪种变化
    A、染色质浓缩;
    B、顶体形成;
    C、线粒体鞘形成;
    D、减数分裂完成。

2、在哺乳动物胚胎发育过程中,生殖细胞来源于
    A、性腺原基;
    B、原始生殖细胞;
    C、胚内内胚层;
    D、胚内外胚层。

3、精子发生的部位是
    A、睾丸横隔;
    B、睾丸输出网;
    C、附睾头;
    D、生精小管。

4、关于精子发生过程以下说法错误的是
    A、精原细胞位于生精小管基部。
    B、在每一次精子发生周期中,总有部分A型精原细胞作为精原干细胞保留下来作为下一次精子发生周期的起始细胞。
    C、B型精原细胞进一步发育,开始有丝分裂,即为初级精母细胞。
    D、一个初级精母细胞经过减数分裂后形成四4个单倍体精子细胞。

5、受精时,与卵母细胞发生膜融合的精子部位是
    A、精子头部顶端细胞膜;
    B、精子头部顶端顶体外膜;
    C、精子赤道段细胞膜;
    D、精子头部顶端顶体内膜。

6、在精子尾部主段横切面超微结构图中,以下哪种结构不可见
    A、轴丝;
    B、外周致密纤维;
    C、纤维鞘;
    D、线粒体鞘。

7、在精子尾部末段横切面超微结构图中,可见以下哪种结构
    A、轴丝;
    B、外周致密纤维;
    C、纤维鞘;
    D、线粒体鞘。

8、初级卵母细胞的减数分裂进程被阻滞于
    A、第一次减数分裂中期;
    B、第一次减数分裂前期;
    C、第二次减数分裂中期;
    D、第二次减数分裂后期。

9、次级卵母细胞的减数分裂进程停滞于
    A、第一次减数分裂中期;
    B、第一次减数分裂前期;
    C、第二次减数分裂中期;
    D、第二次减数分裂后期。

10、成熟卵母细胞的减数分裂进程处于
    A、第一次减数分裂中期;
    B、第一次减数分裂前期;
    C、第二次减数分裂中期;
    D、减数分裂完成。

11、卵母细胞减数分裂开始恢复的标志是
    A、生发泡形成;
    B、生发泡破裂;
    C、排出第一极体;
    D、排出第二极体。

12、关于卵母细胞第一次减数分裂阻滞的机制以下说法错误的是
    A、卵泡壁颗粒细胞分泌C型钠肽至卵泡液当中,C型钠肽与卵丘细胞上的受体NPR2结合,使卵丘细胞内cGMP水平上调。
    B、卵丘细胞内的cGMP通过卵丘细胞与卵母细胞之间的缝隙连接进入卵母细胞。
    C、卵母细胞内高水平的cGMP抑制PDE3A的活性,维持卵母细胞内高水平的cAMP,从而使第一次减数分裂停止在前期。
    D、在FSH的作用下,解除C型钠肽对卵母细胞第一次减数分裂的阻滞作用,卵母细胞恢复减数分裂。

13、以下关于卵母细胞成熟的说法错误的是
    A、在卵母细胞成熟过程中,原本在细胞质内均匀分布的皮质颗粒迁移到卵母细胞质膜下。
    B、成熟卵母细胞内线粒体为帽状线粒体。
    C、卵母细胞只要达到核成熟,就能获得较高的受精率和受精卵发育率。
    D、卵丘细胞扩展常用作判断卵母细胞体外成熟的标志。

14、结构上由一个初级卵母细胞和一层扁平颗粒细胞组成的卵泡为
    A、原始卵泡;
    B、初级卵泡;
    C、次级卵泡;
    D、成熟卵泡。

15、以下关于成熟卵泡说法错误的是
    A、成熟卵泡直径扩展达卵巢皮质的整个厚度,甚至突出于整个卵巢的表面。
    B、成熟卵泡卵泡腔中充满卵泡液。
    C、成熟卵泡内卵母细胞周围由卵丘细胞包围。
    D、成熟卵泡内卵母细胞为成熟卵母细胞。

16、在小鼠胚胎移植前需要制备假孕母鼠,在制备假孕母鼠时,需要结扎公鼠与之交配,其原因是
    A、与结扎公鼠交配后,假孕母鼠卵巢内卵泡才能发育。
    B、与结扎公鼠交配后,假孕母鼠才能正常排卵。
    C、与结扎公鼠交配后,假孕母鼠才能形成有功能黄体,以维持妊娠。
    D、与结扎公鼠交配后,假孕母鼠才能形成能黄体。

17、以下关于卵泡发育内分泌调控机制的说法错误的是
    A、FSH作用于卵泡,刺激颗粒细胞有丝分裂使颗粒细胞增殖,促进卵泡液的形成,从而促进卵泡的生长发育。
    B、FSH刺激颗粒细胞膜上LH受体产生,诱发颗粒细胞对LH的敏感性。
    C、FSH刺激卵泡内膜细胞产生雄激素,在颗粒细胞芳香化酶的作用下,将雄激素转变为雌二醇。
    D、在每一个卵泡波发育周期中,最先被遴选得以发育的卵泡产生抑制素,与雌二醇一起反馈性抑制垂体分泌FSH,使较小卵泡得不到足够的FSH刺激而停止发育,进而闭锁退化。

18、以下关于哺乳动物排卵的描述正确的是
    A、是以卵丘卵母细胞复合体形式排出。
    B、排出的是完成了减数分裂的卵母细胞。
    C、排出的卵母细胞可见第二极体。
    D、是以裸卵的形式排出。

19、透明带是由卵母细胞和颗粒细胞共同分泌形成,参与受精过程中的精卵识别的透明带蛋白为
    A、ZP1;
    B、ZP2;
    C、ZP3;
    D、ZP4。

20、精子成熟的部位是
    A、生精小管;
    B、睾丸输出管;
    C、附睾;
    D、雌性生殖道。

21、精子获能的部位是
    A、生精小管;
    B、睾丸输出管;
    C、附睾;
    D、雌性生殖道。

22、以下关于精子在附睾中的变化的论述中错误的是
    A、在生精小管和睾丸网中,精子在管腔液体中的密度不高,但进入附睾后密度增加。
    B、附睾具有高速胆固醇合成能力,成熟精子可将胆固醇转运入质膜,对精子膜具稳定作用。
    C、精子核内的鱼精蛋白发生二硫键交联而使精子头部硬度加大。
    D、精子在附睾中获得穿过卵丘细胞和透明带的能力。

23、以下关于精子获能的论述中正确的是
    A、精子获能过程中,精子质膜表面的唾液酸残基被酶移去,使质膜表面负电荷减少、膜结合的胆固醇被释放出来使精子质膜结构稳定性增加,流动性减弱。
    B、钙离子内流使腺苷酸环化酶的激活,引起cAMP增加,激活蛋白激酶A,使获能相关蛋白酪氨酸磷酸化从而诱发和维持精子活力,促进精子获能。
    C、精子获能后其运动形式由曲线运动变为直线前进。
    D、精子获能的部位是雄性生殖道。

24、以下关于受精的论述中错误的是
    A、受精发生的部位是输卵管壶腹部。
    B、透明质酸酶可溶解卵丘细胞细胞外基质成分使卵丘细胞松散,促使精子穿过卵丘。
    C、识别ZP3的卵结合蛋白多存在于精子顶体外膜上,称初级卵结合蛋白。
    D、精子的赤道段质膜与卵母细胞微绒毛处质膜接触融合。

25、以下关于哺乳动物早期胚胎发育的论述中错误的是
    A、早期胚胎发育一般指从受精卵到着床前囊胚的发育阶段。
    B、卵裂与普通细胞分裂不同,卵裂细胞不生长而连续分裂。
    C、小鼠胚胎在8-细胞阶段,大部分家畜在16-细胞阶段出现胚胎致密化。
    D、扩张囊胚是指从透明带中孵化出来的囊胚。

26、哺乳动物原始生殖细胞的分化是由细胞内生殖质决定的。

27、精原细胞位于生精小管的近管腔侧。

28、次级精母细胞位于生精小管的近腔侧,核圆,染色深,其染色体数目已经减半。

29、由同一个精原细胞分裂、发育能形成多个精子,称为同源细胞群,同源细胞群之间由胞质间桥连接,构成合胞体。

30、精子头部主要由顶体和精子细胞核组成,顶体覆盖在精子头部外表面上。

31、线粒体为精子的活动提供能量,因此,雌性生殖道越长的动物其精子尾部中段的线粒体鞘螺旋数越多。

32、精子尾部由中段,主段和末端组成。

33、精子尾部的运动装置是由位于中央的两个中央微管和外周包围的九个成对的微管所组成,这个结构称为轴丝。

34、原始卵泡形成后,大部分的原始卵泡在以后的发育中闭锁而只有极少数发育到排卵。

35、生长期的卵母细胞细胞核明显膨大,核内核仁明显,称为生发泡。

36、卵母细胞在发生过程中,减数分裂开始于性成熟期。

37、卵泡壁颗粒细胞分泌C型钠肽至卵泡液当中,C型钠肽与卵母细胞上的受体NPR2结合,使卵母细胞内cGMP水平上调。

38、随着卵母细胞的成熟发育,卵母细胞质膜稳定性发生改变,膜微绒毛重排,变得密集而弯曲,并从透明带内退出或断裂。

39、初级卵泡在结构上由一个初级卵母细胞和一层立方状颗粒细胞组成。

40、次级卵泡在结构上由一个次级卵母细胞和多层立方状颗粒细胞组成。

41、家畜自发排卵后形成的黄体可在发情周期的黄体期分泌孕酮,并能够维持一定时间。

42、腔前卵泡的生长完全依赖于垂体促性腺激素的刺激。

43、体内正常排卵排出的卵丘卵母细胞复合体,最外层为紧密排列的卵丘细胞。

44、扫描电子显微镜镜下观察时,卵母细胞表面遍布丰富的微绒毛。

45、从生精小管中采集的精子即具备运动和受精能力。

46、体外受精时,从附睾尾部采集的精子还需体外获能才具备受精能力。

47、精子在附睾内成熟过程中,精子获得了向前运动的能力,这种向前运动是精子受精能力的重要指标。

48、精子超活化是保证精子穿过透明带的基础。

49、精卵融合后,皮质颗粒内容物释放到透明带外,使透明带蛋白变性,从而阻止多精子受精的发生。

50、囊胚内明显分为两群细胞,即内细胞团和滋养层细胞。

第02章 动物配子发生、受精与早期胚胎发育 作业

1、1. 解释下面的名词(每题1分,共10分) (1)原始生殖细胞 (2)精子发生 (3)精子形成 (4)卵母细胞发生 (5)MII期卵母细胞 (6)GVBD (7)受精 (8)精子成熟 (9)精子获能 (10)精子顶体反应

2、2. 问答题(10分) 描述哺乳动物精子发生、卵母细胞发生的过程,论述二者有何异同?

第03章 动物超数排卵与胚胎移植

第03章 动物超数排卵与胚胎移植 单元测验

1、一个卵泡波是由一组同步发育起来的卵泡组成,但其中只有一个卵泡发育较快而成为该波中最大的卵泡称为
    A、优势卵泡;
    B、闭锁卵泡;
    C、成熟卵泡;
    D、三级卵泡。

2、以下有关卵泡发育优势化现象论述错误的是
    A、一个卵泡波是由一组同步发育起来的卵泡组成,但其中只有一个卵泡发育较快而成为该波中的优势卵泡,其余的则发育较慢,体积较小,在发育过程中逐渐闭锁退化。
    B、卵泡发育的优势化现象指将要排卵的大卵泡抑制其他小卵泡生长发育而使自己优先发育成熟的现象。
    C、优势卵泡在发育过程中分泌某些激素和/或非激素因子,降低了其他卵泡对FSH的敏感性而导致生长发育抑制,不能发育为更多的优势卵泡。
    D、优势卵泡分泌高水平的孕酮和雌二醇,通过长反馈调节机制抑制垂体分泌FSH,使卵巢内FSH浓度降低到维持较小卵泡生长发育所需要的FSH浓度阈值以下,使较小卵泡得不到足够的FSH刺激而停止发育,进而闭锁退化。

3、在动物超数排卵中,促性腺激素使用时间一般安排在4 d左右,主要针对的就是
    A、原始卵泡;
    B、初级卵泡;
    C、闭锁卵泡;
    D、有腔卵泡。

4、以下有关超数排卵激素的论述中错误的是
    A、超数排卵以促性腺激素为主要激素,通常使用促性腺激素作为超数排卵激素,促进母畜卵巢上有较多的卵泡发育和促进排卵。
    B、促进黄体退化的激素和孕激素作为超数排卵的辅助激素,主要作用是控制超数排卵母畜的发情时间,使同一批超数排卵处理母畜同步化发情。
    C、超数排卵以促性腺激素释放激素为主要激素,通常使用促性腺激素释放激素作为超数排卵激素,促进母畜下丘脑分泌促性腺激素,进而达到超数排卵的目的。
    D、超数排卵常用的促卵泡发育激素有促卵泡素(FSH)、孕马血清促性腺激素(PMSG)和人绝经期促性激素(HMG)。

5、以下有关LH的论述中错误的是
    A、LH是动物垂体后叶合成和分泌的一种糖蛋白激素。
    B、LH主要生理作用是与 FSH协同促进卵泡生长成熟、粒膜增生、并参与颗粒细胞合成分泌雌激素,触发排卵和黄体形成,使粒膜细胞转变为黄体细胞。
    C、动物的排卵都依赖于 LH。
    D、在发情周期中,当 LH达到峰值时,即触发排卵,所以人们常用LH促进超数排卵动物排卵。

6、在超数排卵程序中,前列腺素制剂有利于促性腺激素发挥对卵泡发育的促进作用,并有利于超数排卵母畜的发情同步化,是因为前列腺素制剂能够
    A、促进黄体退化;
    B、促进黄体生成;
    C、促进卵泡闭锁;
    D、促进LH合成分泌。

7、根据研究工作对胚胎发育阶段的需要,可在小鼠和大鼠交配后的不同时间从离体输卵管或子宫角采集胚胎,一般桑椹胚以后的胚胎从何处采集
    A、卵巢;
    B、输卵管伞部;
    C、输卵管壶腹部;
    D、子宫角。

8、根据研究工作对胚胎发育阶段的需要,可在小鼠和大鼠交配后的不同时间从离体输卵管或子宫角采集胚胎,一般受精卵从何处采集
    A、卵巢
    B、输卵管伞部
    C、输卵管壶腹部
    D、子宫角

9、根据形态学鉴定标准,以下何种胚胎属于优质胚胎
    A、胚胎发育阶段与胚龄一致, 胚胎呈球形, 形态无异常,轮廓清晰,卵裂球大小、颜色、结构一致,结构紧凑,形成均匀的球形体,细胞界限明显,色调和透光度适中,无附着的细胞和液泡,有较小的卵周隙,透明带圆而平滑。
    B、胚胎发育阶段与胚龄基本一致,胚胎形态基本无异常,大部分卵裂球大小、颜色、结构一致,细胞密度良好,形成均匀球形体,细胞界限明显,少数卵裂球与细胞团联系不紧密,色调及透光度适中,可见到一些附着的细胞碎屑和液泡,变性细胞约占10%~30%,透明带圆而平滑。
    C、胚胎发育阶段与胚龄不太一致,轮廓不清晰,色调发暗,结构较松散,游离的细胞碎屑或液泡较多,变性细胞达30%~50%。
    D、透明带变形,内细胞团变暗,卵裂球界限不清、间隙增大或卵裂球变性为沙砾样,正常的卵细胞很少,形态异常或变性,发育明显迟缓。

10、以下关于羊的胚胎手术移植描述错误的是
    A、羊的胚胎移植,根据移植部位的不同,分为输卵管移植和子宫角移植。
    B、腹壁切开后,以中指伸入腹腔,把子宫角勾在中指内侧并紧贴腹壁内侧向切口方向移动,拇指同时在腹壁外施压,协助中指把子宫角牵引出创口。
    C、输卵管移植时先把黄体侧的输卵管引出,找到喇叭口,将吸有胚胎的移植器械由喇叭口插入,将胚胎移入输卵管。
    D、子宫角移植时将黄体侧子宫角牵引出腹腔后,在其后1/3处避开血管把胚胎移植针插入子宫角内,摆动针头,确认针头在子宫腔时注入胚胎。

11、超数排卵与胚胎移植的意义包括
    A、充分发挥优秀母畜的繁殖潜力,加快品种改良和育种进程。
    B、代替活畜进行种畜交流,加快纯种的扩繁速度,提高母畜繁殖效率。
    C、有利于保存动物遗传资源,有利于珍稀、濒危动物的拯救与保护。
    D、是胚胎工程相关技术体系研究与应用的重要基础手段。

12、超数排卵与胚胎移植的的基本程序主要包括
    A、供体和受体的准备;
    B、供体超排处理与配种;
    C、供体胚胎回收与质量鉴定;
    D、受体同期发情处理;
    E、受体胚胎移植。

13、选择胚胎供体时的一般应注意
    A、供体的遗传学价值;
    B、供体的健康状况和供体的体质与体况;
    C、供体的年龄和胎次;
    D、供体的既往繁殖史。

14、选择胚胎受体时的一般应注意
    A、受体的健康状况;
    B、受体的繁殖性能;
    C、受体的年龄和胎次;
    D、受体与供体的数量比例。

15、超数排卵常用的促排卵激素有
    A、促黄体素(LH);
    B、人绒毛膜促性腺激素(hCG);
    C、促性腺激素释放激素(GnRH);
    D、前列腺素(PG)。

16、以下有关hCG的论述中正确的是
    A、hCG是由妇女妊娠早期的绒毛膜滋养层合胞体细胞产生的糖蛋白激素。
    B、hCG对母畜的生理作用与FSH类似,能促进卵泡发育因此可替代FSH用于超数排卵。
    C、hCG具有一定的抗原性,注射到体内,尤其经过血管注射,会引起抗体形成,一定程度上会影响重复使用的效率。
    D、小鼠常用的剂量为8~10 IU。

17、如已准确观察到母畜的自然发情周期,可采用以下哪种超排程序
    A、在下一次发情开始前4~5 d开始注射促性腺激素进行超排,因此时周期黄体已接近自然溶解退化而不需要使用前列腺素,可使用促性腺激素处理法。
    B、在发情周期的功能黄体期开始注射促性腺激素进行超排,因此时处于周期黄体的功能期,需要在超排程序中使用前列腺素溶解黄体而使发情时间整齐一致,则使用促性腺激素+溶黄体激素处理法。
    C、用孕激素阴道栓处理9~12 d或14~15 d, 然后开始注射促性腺激素进行超排, 在孕激素撤除的同时配合使用前列腺素, 可增加超排发情的同期化效率, 孕激素撤除后即可引起发情和超数排卵。
    D、可先使用注射前列腺素或其类似物(包括一次或两次注射法),或用孕激素处理诱导母畜同期发情。

18、以羊为例,以下关于胚胎回收和胚胎移植描述正确的是
    A、在配种结束后2 d左右从输卵管回收早期卵裂阶段胚胎,并进行受体输卵管移植。
    B、在配种结束后4~6 d左右回收子宫角桑椹胚~囊胚阶段的胚胎,并进行受体子宫角移植。
    C、在配种结束后2 d左右从输卵管回收早期卵裂阶段胚胎,并进行受体子宫角移植。
    D、在配种结束后4~6 d左右回收早期卵裂阶段胚胎,并进行受体输卵管移植。

19、以下关于同期发情描述正确的是
    A、受体与供体的发情时间同步化程度越高,它们的生殖器官内环境和生理状态也就越接近,胚胎移植的受胎率就越高。
    B、在鲜胚移植时,在供体超排的同时,需要对受体进行同期发情处理,使之生殖生理状态与供体同步化。
    C、母畜同期发情处理就是利用某些激素及其制剂人为控制并调整正常发情母畜的发情周期,使受处理母畜在预定的时间内发情和排卵同步化,使其卵巢和生殖道的生理机能处于相同阶段,在预定的时间段内集中发情,有利于移植胚胎的正常生长发育,从而提高胚胎移植效率。
    D、同期发情技术一般采用两类技术方法,即以孕激素为主的同期发情处理方法或以前列腺素类制剂为主的同期发情处理方法。

20、以下关于胚胎移植受体术后护理描述正确的是
    A、对胚胎移植后的受体, 术后要精心观察和护理, 不但要观察其健康状况,对手术移植的动物,尤其要。注意观察创口恢复情况,预防感染,手术移植受体要按期拆线。
    B、要注意观察受体是否返情,若发现受体出现发情,立即重新进行胚胎移植。
    C、受体在术后最好与其他母畜分群饲养,给予充足的营养,注意畜舍清洁卫生,并及时做好妊娠诊断。
    D、羊一般经过三个情期观察而未见发情,可以视为妊娠。

21、经过超数排卵处理提供胚胎的母畜被称为胚胎供体(donor),一般为生产性能一般的品种或个体。

22、根据卵泡发育动力学模型,母畜在每个发情周期中,卵巢内只有一个卵泡启动发育。

23、给予外源促性腺激素,提高血液中促性腺激素水平,就有可能使较多的卵泡获得足够的促性腺激素刺激而发育成优势卵泡,从而增加排卵数。

24、FSH是由动物垂体前叶合成和分泌的一种糖蛋白激素,能有效地刺激母畜卵巢上的卵泡生长发育,可用于各种动物的超数排卵,效果比较稳定可靠,是目前家畜超数排卵中应用最广泛的一种促性腺激素。

25、PMSG的生物学半衰期较短(120~170 min),在一个超排程序中需多次注射。

26、HMG是由绝经期妇女垂体产生的一种糖蛋白激素,由绝经期妇女尿液中提取,使用后主要发挥LH作用,促进卵泡排卵。

27、在超数排卵程序的适当时期撤除孕激素阴道栓,母畜体内孕激素水平迅速下降,有利于同批次超数排卵处理的母畜同步发情,并有利于安排胚胎移植受体母畜的同期发情处理程序,提高胚胎移植效率。

28、胚胎回收的方法可分为离体生殖道回收法、手术回收法和非手术回收法。在实验动物多采用离体生殖道回收法,在牛等大动物采用非手术回收法,在羊和其他中小动物多采用手术回收法。

29、子宫角胚胎回收时,注入冲胚液时要注意子宫角膨胀和回收液流出情况,如子宫角膨胀或出液不畅,需要加大力度用力推进液体,使胚胎冲出。

30、胚胎移植前需要检查受体卵巢上的黄体发育情况,有发育良好黄体的受体不能用于移植。

第03章 动物超数排卵与胚胎移植 单元作业

1、1. 说明超数排卵中常用的生殖激素各自在超数排卵中发挥的作用。(10分)

2、2.动物胚胎回收的方法有几种,各适用于哪些动物?说明手术法子宫角胚胎回收的过程。(10分)

第04章 动物体外受精与胚胎体外培养

第04章 动物体外受精与胚胎体外培养 单元测验

1、从卵巢中采集到的卵母细胞一般是
    A、裸卵;
    B、卵丘-卵母细胞复合体;
    C、成熟卵母细胞;
    D、已受精的卵母细胞。

2、运输时卵巢保存液温度最好保持在
    A、37 ℃;
    B、4 ℃;
    C、22~25 ℃ ;
    D、-20 ℃。

3、小鼠、大鼠采用离体生殖道法收集卵母细胞时,在体视显微镜下,用注射器针头刺破哪个部位,卵丘卵母细胞复合体即会自动流出。
    A、输卵管伞部;
    B、输卵管壶腹部;
    C、卵巢;
    D、子宫。

4、以下关于卵母细胞体外成熟技术的论述错误的是
    A、卵母细胞体外成熟技术减少了激素使用量;
    B、卵母细胞体外成熟技术降低了成本;
    C、卵母细胞体外成熟技术可提供数量较多的卵母细胞;
    D、卵母细胞体外成熟技术获得的卵母细胞质量远高于体内成熟的卵母细胞。

5、近年来研究者们主要使用合成培养液作为卵母细胞体外成熟培养基础培养液,其中以何种培养液应用最多?
    A、TCM-199;
    B、Ham’s F10;
    C、Ham’s F12;
    D、DMEM/F12。

6、以下关于精子体外获能的论述错误的是
    A、“A23187”载体是精子体外获能的常用钙离子载体。
    B、将“A23187”载体添加到不含钙离子的精子体外获能液当中,可使精子钙离子内流,促进精子获能。
    C、钙离子载体对精子作用很强烈,处理时间过长或浓度过高都会导致精子急剧死亡。
    D、白蛋白是雌性生殖道内分泌的主要蛋白质,同时也是精子体内和体外获能的关键物质。

7、精子获能后其运动形式会发生改变,获能精子的运动状态由直线前进变为激烈的尾部鞭打状的
    A、曲线运动;
    B、原地旋转;
    C、直线后退;
    D、原地不动。

8、常规体外受精操作完成后,如何判断受精是否成功?
    A、在精卵孵育4-6小时后,有雌雄原核出现,第二极体排出即为受精卵。
    B、在精卵孵育4-6小时后,有1个极体的即为受精卵。
    C、在精卵孵育4-6小时后,有雌原核出现即为受精卵。
    D、在精卵孵育4-6小时后,有1个原核,1个极体的即为受精卵。

9、早期胚胎是指
    A、受精卵至附植前的胚胎;
    B、受精卵至囊胚腔形成之前的胚胎;
    C、受精卵至胚胎致密化之前的胚胎;
    D、受精卵至合子基因组启动之前的胚胎。

10、小鼠早期胚胎发生合子型基因激活的时期是
    A、受精卵;
    B、2-细胞期;
    C、8-细胞期;
    D、囊胚期。

11、体外受精技术包含以下基本技术环节
    A、卵母细胞的采集和未成熟卵母细胞的体外成熟培养;
    B、精子的采集和精子的体外获能;
    C、成熟卵母细胞与获能精子的体外受精;
    D、受精卵的体外培养和胚胎移植。

12、根据卵母细胞的采集部位,可将卵母细胞采集分为
    A、子宫卵母细胞的采集;
    B、卵巢卵母细胞的采集;
    C、输卵管卵母细胞的采集;
    D、腹腔卵母细胞的采集。

13、一般将牛的卵丘-卵母细胞复合体分为四级,A级:有三层以上完整而致密的卵丘细胞包绕的卵母细胞;B级:卵丘细胞三层以下,部分脱落的卵母细胞;C级:卵丘细胞扩展而松散,卵母细胞胞质无斑块;D级:卵丘细胞全部脱落的裸卵。可用于成熟培养的有
    A、A级;
    B、B级;
    C、C级;
    D、D级。

14、卵母细胞的卵母细胞体外成熟培养后,判断卵母细胞的体外成熟情况的指标包括
    A、第一极体排出;
    B、卵丘细胞扩展;
    C、皮质颗粒迁移;
    D、帽状线粒体。

15、根据将精子或精子细胞注入卵母细胞的位置不同,显微受精操作可分为
    A、精子卵胞质内注射;
    B、精子透明带下注射;
    C、精子原核注射;
    D、精子透明带外注射。

16、移植前遗传学诊断技术是指在显微镜下通过显微操作采集受精卵极体(包括第1极体和第2极体)、胚胎卵裂球或胚胎滋养层细胞,进行遗传学检查,将遗传病检测阴性的胚胎移植到母体子宫内,使之继续生长发育,以避免遗传病患者的出生。

17、卵巢卵母细胞的采集可充分利用母畜的卵巢资源,成本相对较低,是解决卵母细胞来源的有效途径,也是在家畜育种实践中实用性较强的方法。

18、采卵液一般使用无钙离子和镁离子的PBS。

19、进入输卵管的卵母细胞一般为未成熟的卵母细胞,可采用离体输卵管回收法或手术法回收输卵管卵母细胞,体外成熟后用于体外受精。

20、卵丘细胞扩展常用作判断卵母细胞体外成熟的标志之一。

21、在卵母细胞体外成熟培养中,卵母细胞的核成熟与胞质成熟同步完成。

22、为了改善体外成熟卵母细胞胞质成熟质量,先抑制卵母细胞恢复减数分裂,延长卵母细胞处于生发泡期的时间,使卵母细胞有充分的时间完成胞质成熟,然后恢复减数分裂完成核成熟,从而达到核成熟和胞质成熟的同步化,有利于体外成熟卵母细胞后续发育能力的提高。

23、肝素是硫酸化程度最高的氨基多糖,已在牛、猪、山羊、绵羊、马和驴的精子获能中得到了广泛应用。

24、精子透明带下注射技术,通常使用的精子是未获能精子。

25、小鼠早期胚胎发育阶段,由于缺乏葡萄糖代谢酶而使培养液中的葡萄糖表现出对胚胎发育的促进作用。

第04章 动物体外受精与胚胎体外培养 单元作业

1、1. 解释下面的名词(每题2分,共10分) (1)体外受精 (2)in vitro maturation (3)显微受精 (4)合子型调控 (5)序贯培养法

2、2. 问答题 请简要论述体外受精技术的基本技术环节。

第05章 动物胚胎与卵母细胞冷冻保存

第05章 动物胚胎与卵母细胞冷冻保存 单元测验

1、评价卵母细胞冷冻-解冻技术体系是否有效的最终标准是
    A、获得冷冻-解冻后形态正常的卵母细胞;
    B、获得冷冻-解冻后存活的卵母细胞;
    C、获得冷冻-解冻卵母细胞的后代;
    D、获得冷冻-解冻后的成熟卵母细胞。

2、使用渗透性冷冻保护剂时,要使保护剂充分渗透到细胞内部,以达到细胞内外保护剂浓度的平衡,一般要将细胞在冻存悬液置何种条件下预冷30~60分钟?
    A、室温;
    B、-20 ℃;
    C、4℃;
    D、液氮蒸汽中。

3、羊胚胎常规冷冻方法中诱发结晶温度是
    A、-3.5~-5℃;
    B、-4~-5℃;
    C、-5~-6℃;
    D、-7℃。

4、牛的胚胎快速冷冻中,冷冻保护液、解冻液与胚胎共同装管法用0.25毫升冷冻细管按何种顺序装管?
    A、解冻液或胚胎保存液50毫米-气泡-含胚胎冷冻保护液5毫米-气泡-解冻液或胚胎保存液20毫米。
    B、气泡-含胚胎冷冻保护液5毫米-解冻液或胚胎保存液50毫米-气泡-解冻液或胚胎保存液20毫米。
    C、解冻液或胚胎保存液50毫米-气泡--解冻液或胚胎保存液20毫米-含胚胎冷冻保护液5毫米-气泡。
    D、气泡-解冻液或胚胎保存液50毫米-含胚胎冷冻保护液5毫米-解冻液或胚胎保存液20毫米-气泡。

5、动物种质资源保存的具体对象主要包括
    A、细胞;
    B、胚胎;
    C、精子和卵母细胞;
    D、卵巢组织。

6、动物种质资源的保存方法包括
    A、常温保存;
    B、低温保存;
    C、超低温冷冻保存;
    D、高温保存。

7、以下关于细胞冷冻损伤的说法正确的是
    A、细胞在冷冻过程中,当温度降到0℃以下时,由于细胞内游离水的冻结或在细胞内外的渗透,细胞可能会受到冰晶损伤和溶质损伤两方面的损伤。
    B、冰晶损伤是指在细胞冷冻过程中,随着温度下降到冰点,细胞内的游离水冻结成冰晶,细胞内所形成的冰晶会对细胞膜、细胞器和细胞中生物活性蛋白的结构造成损伤。
    C、细胞在冷冻过程中,冰晶的形成是不可避免的,但胞内冰晶不一定都是有害的,其关键是冰晶的大小。
    D、在细胞冷冻降温过程中,细胞是否受到冰晶损伤或溶质损伤,主要在于冷冻降温速度的掌握,即冷冻降温速度直接关系到冷冻效果。

8、以下冷冻保护剂属于渗透性保护剂的是
    A、PVP;
    B、PEG;
    C、DMSO;
    D、Gly。

9、以下哪些措施可以提高玻璃化冷冻效果
    A、混合使用几种冷冻保护剂,以降低其中单个冷冻保护剂的浓度,从而减少玻璃化液对保存对象的毒性。
    B、提高玻璃化冷冻的降温速度。
    C、尽量提高甘油使用浓度。
    D、延长冷冻时通过危险温区的时间。

10、以下关于复温速率的说法正确的是
    A、冷冻保存生物样本时,要想获得良好的效果,除了必须有最佳的冷冻速率、合适的冷冻保护剂和冻存温度外,在复苏时也须有最佳的复温速率。
    B、一般来说复温速度要尽量快,如果复温速度过慢,细胞内小的冰晶在解冻过程中会重结晶成较大的冰晶。
    C、迅速升温可使重结晶的晶体数目减到最小,同时,也可使细胞处在高浓度溶质中的时间缩到最短,这样可以减少细胞的“渗透性休克”,恢复正常的生理功能。
    D、解冻时则以极快的速率升温,使细胞瞬间通过危险温区回升到室温,然后脱除细胞内的保护剂,就会使细胞恢复到常态。

11、以下关于胚胎冷冻保存的说法正确的是
    A、胚胎冷冻保存需要使用将冷冻保护剂加入胚胎培养液或胚胎保存液内组成的冷冻保护液、需采取一定的冷冻降温程序、将胚胎在超低温条件下长期保存。
    B、甘油和二甲亚砜对各种动物的胚胎都有良好的保护作用,但在室温下对胚胎有较强的毒性。
    C、与甘油和二甲亚砜相比,丙二醇和乙二醇在快速冷冻过程中更易达到非晶状态,且在非晶状态下有较大的稳定性,不易形成冰晶,从而降低了细胞内冰晶的数量和体积。
    D、与甘油和二甲亚砜相比,丙二醇和乙二醇本身对胚胎的毒性也较小。

12、以下关于胚胎冷冻保护剂配制的说法正确的是
    A、在快速冷冻时,保护液内保护剂的添加浓度一般在10%(V/V)左右。
    B、在一步冷冻时,需增加保护剂浓度,或者以较高浓度的渗透性保护剂与非渗透性保护剂联合使用。
    C、玻璃化冷冻和超快速冷冻时,一般要使用较低的保护剂浓度,并采用冷冻保护剂联合使用的方法,降低保护剂毒性。
    D、非渗透性保护剂不能用于胚胎冷冻保护剂配制。

13、常用的胚胎冷冻方法主要包括
    A、胚胎快速冷冻;
    B、胚胎一步冷冻;
    C、胚胎玻璃化冷冻;
    D、胚胎超快速(玻璃化)冷冻。

14、以下关于胚胎快速冷冻的说法正确的是
    A、胚胎快速冷冻法,或称胚胎程序降温冷冻法,又称常规冷冻法。
    B、胚胎快速冷冻法冷冻降温程序一般在2 h之内,需要程序冷冻仪;胚胎解冻后的存活率和移植成功率都较高,是目前畜牧业生产中进行胚胎冷冻的常用方法。
    C、胚胎快速冷冻所用冷冻保护剂一般选择二甲亚砜、甘油、1,2-丙二醇、乙二醇等,并以1,2-丙二醇和乙二醇最为常用。
    D、胚胎快速冷冻一般常用2.5ml胚胎冷冻细管。

15、以下关于胚胎超快速(玻璃化)冷冻的说法正确的是
    A、胚胎超快速(玻璃化)冷冻法是在玻璃化冷冻的基础上发展而来的胚胎快速冷冻保存方法。
    B、胚胎超快速(玻璃化)冷冻法与传统玻璃化冷冻方法不同的是使用微量体积的玻璃化冷冻保护液,较玻璃化冷冻法进一步提高了冷冻降温速率,有利于减少冷冻损伤。
    C、采用胚胎超快速(玻璃化)冷冻法,胚胎的装载简单迅速。
    D、开放式拉管冷冻法、冷环冷冻法、尼龙网法等是胚胎超快速(玻璃化)冷冻法中的常用方法。

16、以下关于胚胎解冻过程的说法正确的是
    A、一般来说,快速解冻的胚胎存活率优于缓慢解冻。
    B、快速解冻时,使胚胎在30~40 s内由-196℃上升至30~35℃,瞬间通过危险温区,使其来不及在升温过程中通过危险温区时重新形成冰晶。
    C、从液氮中取出的胚胎细管先在室温空气中停留一段时间(10 s~15 s),使温度缓慢回升,然后浸入30~35℃的温水中继续解冻,使胚胎迅速通过危险温区,可降低透明带破损率,提高移植成功率。
    D、玻璃化冷冻和超快速(玻璃化)冷冻的胚胎,可适当升高解冻水浴温度,并在解冻后迅速脱除保护剂。

17、以下关于卵母细胞冷冻保存的说法正确的是
    A、卵母细胞的冷冻保存,在胚胎工程技术研究与应用、动物繁育、濒危野生动物保护以及人类不孕症治疗等方面,都具有独特的优势和应用价值。
    B、将优良家畜或珍稀动物的卵母细胞进行冷冻保存,可充分有效地利用卵母细胞资源,为卵母细胞体外成熟、体外受精、核移植和转基因动物生产等胚胎工程技术提供充足的材料,并使这些胚胎工程技术的研究与应用不受时间的限制。
    C、对优良家畜和珍稀濒危野生动物而言,其雌性个体的遗传贡献对物种的保存和保护具有更大的价值。如能实现卵母细胞的冷冻保存,则可与精子和胚胎冷冻保存一起,构建动物种质资源库。
    D、在人胚胎的冷冻保存和交互移植上存在伦理和法律上的争议与限制,而卵母细胞冷冻保存则可规避这一问题,卵母细胞的冷冻保存有助于建立接纳捐赠卵子的卵子库,向无卵妇女提供卵子,从而在人类不孕症治疗方面发挥重要作用,并可提高人工辅助生殖技术应用的灵活性。

18、卵母细胞冷冻保存一直较为困难,其原因是
    A、卵母细胞结构特殊、体积较大。
    B、卵母细胞含水量大而且冷冻时脱水困难。
    C、卵母细胞数量较少。
    D、卵母细胞有透明带,阻止了冷冻保护剂进入卵母细胞内部。

19、以下关于卵巢冷冻保存的说法正确的是
    A、卵巢冷冻保存的研究发展较快,其冷冻保存的价值与卵母细胞相当,可望成为一种长期保存雌性配子的实用技术体系。
    B、卵巢冷冻保存和活体移植被认为是将来建立动物卵子库的一项新的技术体系。
    C、对于突然死亡的珍稀物种或稀有突变体动物的卵巢予以及时的冷冻保存,在需要时,通过将解冻的卵巢移植入动物体内获得成熟卵泡,并通过试管动物技术而获得该物种,从而在保持生物多样性方面发挥作用。
    D、对临床上因治疗需要暂时不能妊娠或治疗措施可能会使病人失去性腺(卵巢)功能的情况下,在治疗前先将卵巢组织冷冻保存,病愈后将卵巢组织自体移植而获得成熟卵泡的技术方法,是病人重新获得生育能力的理想技术措施。

20、以下关于非渗透性保护剂的说法正确的是
    A、非渗透性保护剂一般都是大分子物质,不能渗透到细胞内部。
    B、非渗透性保护剂能溶于水、稀释细胞外电解质的浓度,从而减少溶质损伤。
    C、非渗透性保护剂可结合水分子,降低细胞外游离水的含量,减少胞外冰晶的形成。
    D、由于不同大分子的化学结构和性质的差异,使不同的非渗透性冷冻保护剂在快速冷冻和缓慢冷冻的过程中,所起的保护作用有较大差别。

21、细胞内的水分以游离水和结合水两种状态存在,在细胞冷冻过程中,细胞内的游离水和结合水的冻结特性一致。

22、冷冻保护剂容易同溶液中水分子结合,从而可升高冰点,减少冰晶的形成,并且升高未结冰溶液中电解质的浓度,使细胞免受溶质损伤。

23、甘油属于渗透性冷冻保护剂。

24、就胚胎而言,在不同动物,由于胚胎的大小、细胞含水量、渗透性的不同,诱发结晶温度也不一样。

25、玻璃化冻存的核心,一是寻求容易实现玻璃化并且对细胞损害较小的溶液,二是设法提高冷冻降温速度。

26、目前动物胚胎和卵母细胞冷冻保存的冷源一般使用干冰。

27、胚胎冷冻程序中冻前平衡就是在平衡过程中使冷冻保护剂渗入胚胎置换胚胎细胞内的游离水,使胚胎在冷冻过程中保持渗透平衡,有利于胚胎细胞保持存活。

28、开放式拉管冷冻法使用拉得很细的薄壁细管,利用毛细现象,将极微量冷冻液滴连同胚胎一起吸入毛细管内后,直接投入干冰冷冻保存。

29、在冷冻直径较大的胚胎时,在将胚胎连同冷冻保护液加载于尼龙网后,将尼龙网置于吸水纸上, 将胚胎周围的玻璃化冷冻保护液从网孔部分吸除, 使胚胎周围冷冻保护液能够近乎完全地被去除, 可以尽可能地加快冷却速率从而更有效地减少冰晶形成, 以提高冷冻保存效果。

30、将含冷冻保护剂的胚胎直接移植给受体动物,可提高妊娠率。

第05章 动物胚胎与卵母细胞冷冻保存 单元作业

1、请简要论述动物胚胎和卵母细胞冷冻保存原理。

2、请简要论述动物胚胎快速冷冻的技术要点。

第06章 动物性别控制

第06章 动物性别控制 单元测验

1、以下有关性别决定的说法正确的是
    A、性别决定是指在细胞内遗传物质的作用下,产生性别分化,并形成种群内雌雄个体差异的过程。
    B、不同动物性别决定的机制是不同的,大多数取决于性染色体的差异,少数取决于体细胞染色体的倍性,极少数决定于个体发育所处的内、外环境条件。
    C、动物性别决定分为遗传型性别决定和环境依赖型性别决定。
    D、哺乳动物性别决定为遗传型性别决定。

2、以下有关哺乳动物性别决定的说法正确的是
    A、哺乳动物为遗传型性别决定,受精卵的染色体组成是性别决定的物质基础。
    B、哺乳动物的雄性个体是异配子性别,含有一对异型的性染色体X和Y。
    C、哺乳动物的雌性个体是同配子性别,含有两条同型的性染色体X和X。
    D、XXY型哺乳动物个体发育为雄性个体,但不具有生殖能力。

3、以下说法正确的是
    A、蜜蜂群体中雄蜂由受精卵发育而来。
    B、蜜蜂群体中雄蜂由未受精卵发育而来。
    C、蜜蜂群体中雄蜂是单倍体。
    D、蜜蜂群体中雄蜂是二倍体。

4、以下有关哺乳动物性别决定的两个法则的说法正确的是
    A、在性腺发育过程中,其特化为睾丸或卵巢决定着胚胎后来的性分化。
    B、Y染色体上携带有为雄性性别决定所必需的遗传信息。
    C、发育中的睾丸能产生某些使胎儿雄性化的物质,其主要的效应子是睾酮。
    D、人类和小鼠的Y染色体短臂(Yp)上含有睾丸决定因子/基因,其实质就是SRY。

5、以下有关SRY基因的说法正确的是
    A、SRY基因位于Y染色体短臂上。
    B、人类的SRY基因只有一个外显子,长850 bp,该基因有一个多聚腺苷酸位点和两个转录起始点,其间是一个可读框,可编码204个氨基酸的蛋白质,其中包含可编码79个氨基酸的保守区(HMG盒)。
    C、SRY基因的HMG盒在哺乳动物间具有高度的同源性。
    D、SRY基因在雌性中不存在,被称为性别决定基因,因此其它位于X染色体和常染色体上的基因与睾丸的发育无关。

6、以下有关哺乳动物性别决定过程的说法正确的是
    A、哺乳动物性别决定过程即指在胚胎发育早期,由一个性别未分化的性腺发育为睾丸或卵巢的过程。
    B、睾丸或卵巢的发育属于次级性别决定。
    C、未分化的性腺原基处于中性,如果没有Y染色体(即没有性别决定基因)存在时,性腺原基发育为卵巢,由卵巢产生的雌激素能够使缪勒氏管发育为阴道、子宫颈、子宫和输卵管等。
    D、睾丸一旦形成,其间质细胞分泌睾酮,支持细胞分泌抗缪勒氏管因子。

7、以下有关SRY基因及性腺细胞在性别决定中的作用的说法正确的是
    A、SRY指导了支持细胞前体向Sertoli细胞发育。
    B、SRY指导了类固醇生成细胞前体向leydig 细胞发育。
    C、SRY的表达早于生殖嵴分化为睾丸。
    D、SRY表达具有精确的时间性和组织特异性。

8、以下有关家畜性别控制的意义的说法正确的是
    A、在畜牧养殖业中,实施家畜性别控制,可以显著提高受性别决定的生产性能,从而提高畜牧业经济效益。
    B、通过控制胚胎性别,还可克服牛胚胎移植中出现的异性孪生母犊不育现象,排除伴性有害基因的危害。
    C、实施性别控制,可加快奶畜群的更新。
    D、通过性别控制,可增加选种强度,加快遗传进程。

9、在畜牧业生产中,具有实践价值的家畜性别控制的途径包括
    A、受精前控制;
    B、附植前控制;
    C、附植后控制;
    D、出生后控制。

10、控制家畜性别最简单的方法就是分离X、Y精子,这类方法的依据是X精子与Y精子的哪些特性不同实现X、Y精子的分离。
    A、密度;
    B、体积;
    C、DNA含量;
    D、表面抗原。

11、以下有关流式细胞仪分离精子的基本原理的说法正确的是
    A、经过处理的精子与活细胞荧光染料(Hoechst 33342)在一定条件下共同孵育一段时间,由于X、Y精子在DNA含量上的差异,导致其结合的荧光染料的量也有所差异。
    B、当DNA荧光染色的精子(X、Y精子)通过流式细胞仪时,精子上的荧光染料被氩离子紫外激光激发,产生蓝色荧光信号强弱也有差异(X精子较强)。
    C、C荧光信号通过光电倍增管探测并转变成电信号,传递给流式细胞仪的信息处理芯片,由它迅速根据DNA含量的差别分辨出哪个是X精子、哪个是Y精子,处理得到的信息又迅速反馈回到含精子的液流上,使之充上正电荷或者负电荷。
    D、携带不同电荷的包含有X精子或者Y精子的液滴在电场作用力的引导下,落入左右两旁的收集容器中,X精子和Y精子得以分离。

12、以下哪些措施可以提高流式细胞仪分辨X和Y精子的准确率和效率
    A、合适的精子荧光染色方法。
    B、改进流式细胞仪喷嘴和电场的系统设计,结合系统压力的调整,提高单精子液滴的产生率。
    C、采用合适的鞘液、收集液、保存液和保存方式等提高分离后精子的活力和膜的完整性。
    D、不断提高系统压力,加快分离速度。

13、以下有关依据H-Y抗原抗体免疫反应的精子分离法的说法正确的是
    A、雄性特异性弱组织相容性Y抗原简称为H-Y抗原。
    B、在雄性动物产生的精子中,只有Y精子才表达H-Y抗原。
    C、利用H-Y抗体对H-Y抗原进行检测,再通过一定的分离程序,能将精子分离成为H-Y+(Y精子)和H-Y-(X精子)两类。
    D、依据H-Y抗原抗体免疫反应的精子分离法在研究中都获得了一定的成功,但难以达到在生产上大规模应用的要求,主要用于一些实验动物的精子性别分离。

14、利用H-Y抗原分离X、Y精子的方法主要包括
    A、免疫亲和柱层析法;
    B、直接分离法;
    C、免疫磁珠法;
    D、密度梯度离心法。

15、以下技术可用于胚胎性别鉴定的是
    A、胚胎细胞核型分析法;
    B、X-染色体相关酶活性分析;
    C、H-Y抗原检测;
    D、SRY基因鉴定。

16、利用胚胎性别鉴定的性别控制法中胚胎H-Y抗原检测方法主要包括
    A、胚胎细胞毒性分析法;
    B、胚胎 H-Y抗原间接免疫荧光分析法;
    C、囊胚形成抑制法;
    D、环介导恒温DNA扩增。

17、以下有关鉴定胚胎H-Y抗原的胚胎细胞毒性分析法的原理正确的说法是
    A、该方法需要补体(豚鼠血清)。
    B、H-Y抗体可以与 H-Y+ 胚胎结合并使其中1个或更多的卵裂球溶解、或使卵裂球呈现不规则的体积和形状、阻滞了胚胎的发育。
    C、受细胞毒性影响的胚胎为雄性胚胎,仍能正常发育者为雌性胚胎。
    D、这种方法进行胚胎性别鉴定时,要以损失雄性胚胎为代价,而且难以做到完全准确,并降低了胚胎的成活率,在生产实践中推广应用的价值不大。

18、以下有关囊胚形成抑制法的说法正确的是
    A、囊胚形成抑制法是利用H-Y抗体能够可逆性抑制雄性胚胎从桑椹胚向囊胚发育的原理发展起来的一种早期胚胎性别鉴定方法。
    B、将H-Y抗血清与桑椹胚共培养一段时间,具有H-Y抗原的雄性胚胎被H-Y抗体所抑制,不能形成囊胚腔,而无H-Y抗原的雌性胚胚则不被H-Y抗体所抑制,可在培养过程中继续发育形成囊胚,以此可将雄胚与雌胚分开。
    C、用囊胚形成抑制法鉴定的胚胎移植后,与正常胚胎的发育无异,因而是一种比较实用的技术。
    D、这种方法容易将一部分发育迟缓的雌性胚胎误判为雄性胚胎。

19、利用分子生物学方法鉴定胚胎性别的性别控制法包括
    A、雄性特异性DNA探针法;
    B、荧光原位杂交法;
    C、PCR扩增Y染色体特异序列(SRY基因)法;
    D、环介导恒温DNA扩增法。

20、造成PCR扩增Y染色体特异序列(SRY基因)法和环介导恒温DNA扩增法产生假阳性结果的原因包括
    A、在采集胚胎细胞时取到粘在胚胎上的精子。
    B、在采集胚胎细胞时切割刀粘上另一个胚胎的细胞。
    C、空气中的污染、PCR试剂的污染。
    D、培养液中的牛血清白蛋白、胎牛血清的污染。

21、哺乳动物属于遗传型性别决定动物,性别决定的染色体基础是雌性异配子型。

22、对于哺乳动物,如果在受精前分离X、Y精子,只用一种精子与含有X染色体的卵母细胞进行受精,或者抑制其中一种精子的活性,用有活性的另一种精子与卵母细胞进行受精,则形成的受精卵性别比例就会偏离1:1的遗传学比例。

23、雌性哺乳动物为XX核型,雄性哺乳动物为XY核型。雄性动物的Y染色体含有一个雄性决定基因,是性别决定的重要遗传因子,而雌性的发育则是在该基因缺失时的一种欠缺性选择。

24、克隆Sry基因并制备探针,并与小鼠基因组DNA杂交,可在雌性小鼠基因组中显示特异性杂交信号。

25、哺乳动物的胚胎在性别分化过程中,雄性是其默认性别。

26、性别控制即通过人为地干预或操作,使动物按照人们的设计繁殖出所需性别后代的生物技术。

27、流式细胞术应用于X、Y精子分离,其原理是依据X、Y精子运动速度不同实现X、Y精子的分离。

28、流式细胞仪分离精子时,经过Hoechst染料进行DNA染色的精子,染料渗入精子膜会引起精子的明显损伤,进而影响精子的受精功能。

29、哺乳动物早期胚胎性别鉴定作为实现性别控制的重要途径之一,属于附植后性别控制方法。

30、以H-Y抗体作为第一抗体,以用异硫氰酸荧光素(FITC)标记的山羊抗鼠γ球蛋白作为第二抗体,将上述两种抗体依次与胚胎共同培养时,雄性胚胎上的抗体先与一抗结合,一抗再与二抗结合,通过洗涤将未结合到胚胎上的二抗洗去。由于二抗用FITC标记,在荧光显微镜下观察时结合有二抗的胚胎显荧光,即为雌性胚胎,不显荧光者则为雄性胚胎。

第06章 动物性别控制 单元作业

1、请从哺乳动物性别决定类型、性别比例、性别决定理论、性别决定基因、性别决定过程等方面,简要论述哺乳动物性别决定的原理。

2、请简要论述目前常用的家畜性别控制途径。

第07章 动物胚胎干细胞

第07章 动物胚胎干细胞 单元测验

1、胚胎干细胞通常是由( )获得的。
    A、胚胎内细胞团;
    B、胚胎滋养层细胞;
    C、颗粒细胞;
    D、蜕膜细胞。

2、按照细胞分化潜能由大到小排列顺序,正确的是 ( )。
    A、全能干细胞→专能干细胞→多能干细胞。
    B、多能干细胞→胚胎干细胞→专能干细胞。
    C、胚胎干细胞→骨髓造血干细胞→专能干细胞。
    D、胚胎干细胞→多能干细胞→造血干细胞。

3、关于胚胎干细胞应用的叙述,错误的是 ( )。
    A、可以用于治疗由于细胞坏死、退化或功能异常引起的疾病。
    B、在体外诱导分化可培育出人造组织器官。
    C、是研究体外细胞分化的理想材料。
    D、不能用于治疗糖尿病、肝衰竭等疾病。

4、下列关于胚胎干细胞的叙述中,错误的是 ( )。
    A、一般都取自动物早期胚胎或胎儿生殖嵴。
    B、胚胎干细胞是一种原始细胞。
    C、胚胎干细胞具有自我更新和多向分化潜能。
    D、汤姆森建立小鼠胚胎干细胞系,开创了该研究领域之先河。

5、下列不属于胚胎干细胞用途的是 ( )。
    A、阐明细胞分化中各调节因子的作用机制;
    B、在试管中改良创造动物新品种;
    C、培育超级小鼠;
    D、生产有价值的药物。

6、关于胚胎干细胞的叙述,不正确的是 ( )。
    A、细胞体积较小、细胞核明显。
    B、体外培养可以增殖而不分化。
    C、目前已经在体外诱导分化出不同器官。
    D、可以从哺乳动物的囊胚内细胞团中分离获取。

7、诱导性多能干细胞可通过下列哪种方式获得 ( )。
    A、导入特定基因;
    B、改变细胞培养温度获得;
    C、从人或动物内细胞团分离;
    D、从人或动物胎儿生殖嵴分离。

8、下列有关诱导性多能干细胞的描述错误的是 ( )。
    A、具有多向分化潜能;
    B、只能通过向体细胞中转入特定基因获得;
    C、具有与胚胎干细胞相似的分化潜能;
    D、Yamanaka 因为在该研究领域的贡献获得了2012年诺贝尔生理学或医学奖。

9、胚胎干细胞培养的基本原则是 ( )。
    A、在体外建立抑制其增殖,同时促进其分化的培养系统。
    B、在体外建立适合其增殖,同时抑制其分化的培养系统。
    C、在体外建立适合其增殖,同时促进其分化的培养系统。
    D、在体外建立抑制其增殖,同时抑制其分化的培养系统。

10、以下哪种方法不能用于胚胎干细胞的诱导分化 ( )。
    A、外源性细胞因子诱导法;
    B、转基因诱导法;
    C、与其他细胞共培养法;
    D、改变胚胎干细胞的的培养温度。

11、胚胎干细胞只能来源于早期胚胎。

12、来源于早期胚胎的胚胎干细胞都具有全能性。

13、自我更新和多向分化潜能是干细胞的两大基本特征。

14、胚胎干细胞具有体积大、核小的形态学特点。

15、胚胎干细胞一般都具有稳定的二倍体核型。

16、胚胎阶段特异性表面抗原在胚胎干细胞中的表达具有明显的种属差异性。

17、不同物种来源的胚胎干细胞具有相同的形态学特点。

18、PMEF比STO更适用于胚胎干细胞的培养。

19、诱导性多能干细胞最初是日本科学家Shinya Yamanaka于2006年利用病毒载体将四个转录因子(Oct4, Sox2, Nanog 和c-Myc)的组合转入分化的体细胞中,使其重编程而得到的一种细胞类型。

20、利用iPS技术可以用病人自己的体细胞制备专有的干细胞,降低了免疫排斥发生的可能性。

第07章 动物胚胎干细胞 单元作业

1、1. 问答题 什么是干细胞的自我更新和多向分化潜能?全能干细胞、多能干细胞和单能干细胞有何异同,请举例说明?

第08章 动物克隆技术

第08章 动物克隆技术 单元测验

1、利用无性繁殖技术,由单一个体产生基因型完全一致动物个体或群体的技术称为
    A、动物克隆技术;
    B、胚胎分割技术;
    C、体细胞核移植技术;
    D、胚胎嵌合技术。

2、首次利用分化的体细胞进行核移植获得体细胞克隆动物的科学家是
    A、Ian Wilmut(伊恩·维尔穆特);
    B、John Gurdon(约翰·格登);
    C、Willadsen(维拉德森);
    D、Hans Spemann(汉斯·斯佩曼)。

3、在显微操作过程中,用于固定胚胎或卵母细胞固定针的外径和内径一般为
    A、外径20~30 μm,内径2~3 μm;
    B、外径30~50 μm,内径5~10 μm;
    C、外径50~70 μm,内径10~20 μm;
    D、外径70~120 μm,内径20~30 μm。

4、体细胞克隆技术的基本原理是
    A、哺乳动物早期胚胎卵裂球发育全能性;
    B、体细胞核包含动物个体发育全部遗传信息;
    C、体细胞具备发育全能型;
    D、细胞核具备可塑性。

5、体细胞核移植过程中为了让供体细胞周期与卵母细胞兼容的处理方法是
    A、添加生长因子;
    B、血清饥饿;
    C、胰酶消化;
    D、添加细胞松弛素B。

6、卵母细胞去核方法不包括那一种
    A、盲吸去核法;
    B、Spindle-view去核法;
    C、DNA染色去核法;
    D、超速离心。

7、小鼠体细胞核移植过程中供体细胞移植入去核卵胞质中的最佳方法是
    A、用显微操作针直接将供体细胞注入卵胞质。
    B、供体细胞注入透明带下,然后利用电融合将供体细胞与卵子融合。
    C、利用压电式脉冲装置Piezo将供体细胞注入卵胞质。
    D、化学融合法。

8、牛、羊克隆胚胎的常用激活方法是
    A、ion 3~5 min + 6D 3~5 h;
    B、SrCl2+CB 4 h;
    C、SrCl2+CB 10 h;
    D、电激活。

9、胚胎嵌合技术可制备克隆动物。

10、胚胎嵌合技术可制备转基因动物。

11、2倍体胚胎与4倍体胚胎嵌合产生胚胎嵌合动物。

12、内细胞团囊胚腔注射可产生胚胎嵌合动物。

第08章 动物克隆技术 单元作业

1、简述动物克隆技术的概念和分类?

2、简述体细胞克隆技术的操作流程?

第09章 动物转基因技术

第09章 动物转基因技术 单元测验

1、整合到受体动物基因组上的外源基因称为
    A、目的基因;
    B、靶基因;
    C、靶位点;
    D、标记基因。

2、利用病毒载体制备转基因动物的优点是
    A、安全性高;
    B、精确整合;
    C、整合效率较高;
    D、可制备纯合子转基因动物。

3、基因打靶载体与普通质粒载体的主要区别是
    A、基因打吧载体不是质粒载体;
    B、基因打靶载体具有同源臂序列;
    C、基因打靶载体转染效率高;
    D、基因打靶载体整合效率高。

4、条件性基因打靶主要利用那一类转基因载体实现的
    A、转座子系统;
    B、整合酶系统;
    C、Cre/loxP重组酶系统;
    D、人工染色体系统。

5、要在动物细胞或者动物体内实现基因过表达不能利用那类转基因策略
    A、基因定点整合;
    B、基因敲入;
    C、随机整合;
    D、RNA干扰。

6、显微注射转基因技术不适用的方面包括
    A、原核DNA注射;
    B、胞质内DNA注射;
    C、胞质内RNA注射;
    D、透明带RNA下注射。

7、大家畜原核显微注射转基因技术与小鼠相比的主要差异是
    A、注射的DNA量不同;
    B、DNA注射的原核不同;
    C、受精卵需要离心处理;
    D、受精卵需要利用CB处理。

8、原核显微注射转基因技术的最大缺点是
    A、DNA片段大小受限;
    B、外源基因随机整合;
    C、操作复杂;
    D、费用高。

9、慢病毒载体是利用哪一种病毒改造而来
    A、艾滋病病毒;
    B、流感病毒;
    C、冠状病毒;
    D、流行性腹泻病毒。

10、慢病毒转基因技术的最大优点是
    A、操作相对简单,整合效率较高;
    B、载体承载量较大;
    C、安全性较高;
    D、不容易产生基因沉默。

11、利用体细胞克隆技术制备转基因动物,转基因动物阳性率可达到
    A、大于10%;
    B、小于10%;
    C、100%;
    D、50%。

12、利用转基因克隆技术制备基因动物过程中,基因修饰的检测是在哪个阶段完成的
    A、载体构建;
    B、转基因细胞制备;
    C、克隆胚胎制备;
    D、转基因动物出生后。

13、胚胎干细胞介导的转基因技术主要适用于制备
    A、基因敲除小鼠;
    B、所有转基因动物;
    C、转基因家畜;
    D、基因打靶家畜。

14、当前应用最广泛的基因编辑系统是
    A、ZFN;
    B、TALEN;
    C、CRISPR/Cas9;
    D、Cre/loxP。

15、基因编辑系统与传统基因打靶技术相比的最大优势是
    A、提高了同源重组效率;
    B、提高了安全性;
    C、降低了随机整合效率;
    D、提高了转染效率。

16、CRISPR/Cas9基因编辑系统与ZFN和TALEN相比的优势是
    A、操作简单,适用范围广;
    B、提高了安全性;
    C、降低了随机整合效率;
    D、提高了同源重组效率。

17、转基因动物是机体所有细胞基因组都插入了人工重组的外源DNA序列的动物。

18、基因编辑技术是更加精确的转基因技术。

19、制备转基因动物主要选择对人类和动物有益的基因,一般不选择有害基因。

20、转基因克隆技术中,各种转基因载体均适用于转基因供体细胞的制备。

21、转基因克隆技术适用于制备基因打靶转基因动物。

22、胚胎干细胞介导的转基因技术可用于制备条件性基因打靶小鼠。

23、胚胎干细胞介导的转基因技术的显著缺点是外源基因整合情况不可控。

24、转基因育种与传统育种都是通过改变基因及其组成以获得优良性状。

25、根据世界卫生组织和联合国粮农组织的评估,商品化的转基因产品都是安全的。

26、有研究表明市场上部分转基因产品有致癌、致畸和致不孕风险。

27、我国已经批准商业化种植转基因水稻和小麦。

28、我国未批准转基因动物产品商业化。

第09章 动物转基因技术 单元作业

1、说明制备转基因动物的常用方法和优缺点。

2、根据转基因动物的制备目的,说明转基因策略和转基因载体的选择要点。

动物胚胎工程 考试试卷

动物胚胎工程 考试试卷 客观题部分

1、小鼠胚胎移植前需要制备假孕母鼠,在制备假孕母鼠时,需要结扎公鼠与之交配,其原因是
    A、与结扎公鼠交配后,假孕母鼠卵巢内卵泡才能发育。
    B、与结扎公鼠交配后,假孕母鼠才能正常排卵。
    C、与结扎公鼠交配后,假孕母鼠才能形成有功能黄体,以维持妊娠。
    D、与结扎公鼠交配后,假孕母鼠才能形成能黄体,以维持妊娠。

2、以下关于哺乳动物早期胚胎发育的论述中错误的是
    A、早期胚胎发育一般指从受精卵到着床前囊胚的发育阶段。
    B、卵裂与普通细胞分裂不同,卵裂细胞不生长而连续分裂。
    C、小鼠胚胎在8-细胞阶段,大部分家畜在16-细胞阶段出现胚胎致密化。
    D、扩张囊胚是指从透明带中孵化出来的囊胚。

3、在动物超数排卵中,促性腺激素使用时间一般安排在4 d左右,主要针对的就是
    A、有腔卵泡;
    B、原始卵泡;
    C、初级卵泡;
    D、闭锁卵泡。

4、在超数排卵程序中,前列腺素制剂有利于促性腺激素发挥对卵泡发育的促进作用,并有利于超数排卵母畜的发情同步化,是因为前列腺素制剂能够
    A、促进黄体退化;
    B、促进黄体生成;
    C、促进卵泡闭锁;
    D、促进LH合成分泌。

5、按照细胞分化潜能由大到小排列顺序,正确的是
    A、胚胎干细胞→多能干细胞→造血干细胞
    B、全能干细胞→专能干细胞→多能干细胞
    C、胚胎干细胞→骨髓造血干细胞→专能干细胞
    D、多能干细胞→胚胎干细胞→专能干细胞

6、动物胚胎工程的主要操作对象是
    A、精子
    B、卵母细胞
    C、受精卵
    D、早期胚胎

7、超数排卵常用的促排卵激素有
    A、促黄体素(LH)
    B、人绒毛膜促性腺激素(hCG)
    C、促性腺激素释放激素(GnRH)
    D、前列腺素(PG)

8、以羊为例,以下关于胚胎回收和胚胎移植描述正确的是
    A、在配种结束后2 d左右从输卵管回收早期卵裂阶段胚胎,并进行受体输卵管移植。
    B、在配种结束后4~6 d左右回收子宫角桑椹胚~囊胚阶段的胚胎,并进行受体子宫角移植。
    C、在配种结束后2 d左右从输卵管回收早期卵裂阶段胚胎,并进行受体子宫角移植。
    D、在配种结束后4~6 d左右回收早期卵裂阶段胚胎,并进行受体输卵管移植。

9、控制家畜性别最简单有效的方法就是分离X、Y精子,这类方法所依据的是X精子与Y精子的哪些不同特性而实现的。
    A、密度
    B、体积
    C、DNA含量
    D、表面抗原

10、以下技术可用于胚胎性别鉴定的是
    A、胚胎细胞核型分析法
    B、X-染色体相关酶活性分析
    C、H-Y抗原检测
    D、SRY基因鉴定

动物胚胎工程 考试试卷 主观题部分

1、名词解释:同期发情

2、名词解释:Vitrification cryopreservation

3、名词解释:精子获能

4、名词解释:冷冻保护剂

5、名词解释:MII oocyte

6、名词解释:性别控制

7、名词解释:自我更新

8、名词解释:体细胞核移植技术

9、名词解释:原核显微注射技术

10、名词解释:基因编辑技术

11、简答题:简述精子发生的过程。

12、简答题:超数排卵常用激素有哪些?

13、简答题:胚胎干细胞诱导分化的方法主要有哪些,请简要说明?

14、简答题:采集到的牛卵母细胞,依据卵丘-卵母细胞复合体的外形可将卵母细胞分为几级?各自的特征是什么?

15、简答题:简述锌指核酸酶基因编辑技术的设计原理。

16、论述题:动物胚胎超低温冷冻保存时使用的冷冻保护剂抵抗胚胎冷冻损伤的原理。

17、论述题:分别论述显微注射、慢病毒、体细胞核移植和胚胎干细胞介导的转基因技术的适用范围和优缺点。